Protéines dans l'urine, tests de laboratoire. Algorithme de détermination de la date prévue d'accouchement et de la durée du congé prénatal

Une petite quantité de protéines dans l'urine quotidienne se trouve dans individus en bonne santé, cependant, de si petites concentrations ne sont pas détectées en portions uniques par les méthodes actuellement utilisées. Environ 70 % des protéines présentes dans l'urine d'une personne en bonne santé sont de l'uromucoïde, une protéine issue du tissu rénal ; ainsi, la proportion de protéines glomérulaires dans l'urine personnes en bonne santé est négligeable et la protéinurie est normalement de 50 à 150 mg/jour, la plupart des protéines urinaires étant identiques aux protéines sériques.

Il est d'usage de distinguer les formes suivantes de protéinurie selon le lieu de survenue : prérénale, associée à une dégradation accrue des protéines tissulaires, une hémolyse sévère ; rénal, causé par une pathologie rénale, qui peut être divisé en glomérulaire et tubulaire ; postrénal, associé à une pathologie voies urinaires et le plus souvent causées par une exsudation inflammatoire.

Selon la durée d'existence, on distingue une protéinurie constante, existant pendant plusieurs semaines, voire plusieurs années, et transitoire, apparaissant périodiquement, parfois même en l'absence de pathologie rénale, par exemple avec fièvre et intoxication grave. Il convient de distinguer la variabilité de la protéinurie : avec une perte quotidienne de protéines allant jusqu'à 1 g - modérée, de 1 à 3 g - modérée et supérieure à 3 g - sévère.

La détection de protéines de poids moléculaire relativement élevé dans l'urine indique un manque de sélectivité du filtre rénal et ses graves dommages. Dans ces cas, on parle d'une faible sélectivité de la protéinurie. Par conséquent, la détermination des fractions protéiques de l’urine est désormais très répandue. Les méthodes les plus précises sont l’électrophorèse sur gel d’amidon et de polyacrylamide.
Sur la base des résultats obtenus par ces méthodes, on peut juger de la sélectivité de la protéinurie.

La plupart des méthodes qualitatives et quantitatives de dosage des protéines dans les urines reposent sur leur coagulation dans le volume de l'urine ou à l'interface des milieux (urine et acide) ; s'il existe un moyen de mesurer l'intensité de la coagulation, alors l'échantillon devient quantitatif.

Test unifié avec l'acide sulfosalicylique :

Réactif requis :

Solution à 20% d'acide sulfosalicylique.

Avancement de l'étude :

3 ml d'urine filtrée sont versés dans 2 tubes à essai. 6 à 8 gouttes de réactif sont ajoutées au tube à essai. Sur fond sombre comparer le tube témoin avec le tube expérimental. La turbidité dans le tube à essai indique la présence de protéines, l'échantillon est considéré comme positif.

Si la réaction urinaire est alcaline, avant l'étude, elle est acidifiée avec 2-3 gouttes d'une solution à 10 % acide acétique.

Méthode unifiée de Brandberg-Roberts-Stolnikov :

La méthode est basée sur le test annulaire de Heller, qui consiste dans le fait qu'à la frontière de l'acide nitrique et de l'urine, en présence de protéines, celle-ci coagule et un anneau blanc apparaît.

Réactif requis :

Solution d'acide nitrique à 30 % (densité relative 1,2) ou réactif Larionova.
Préparation du réactif de Larionova : 20 à 30 g de chlorure de sodium sont dissous dans 100 ml d'eau distillée lorsqu'ils sont chauffés, laissés refroidir et filtrés. 1 ml d'acide nitrique concentré est ajouté à 99 ml de filtrat.

Avancement de l'étude :

1 à 2 ml d'acide nitrique (ou réactif de Larionova) sont versés dans un tube à essai et la même quantité d'urine filtrée est soigneusement déposée le long de la paroi du tube à essai. L'apparition d'un fin anneau blanc à l'interface des deux liquides entre la 2ème et la 3ème minute indique la présence de protéines à une concentration d'environ 0,033 g/l. Si l'anneau apparaît moins de 2 minutes après la superposition, l'urine doit être diluée avec de l'eau et l'urine déjà diluée doit être à nouveau superposée. Le degré de dilution de l'urine est choisi en fonction du type d'anneau, c'est-à-dire sa largeur, sa compacité et son heure d'apparition. Si un anneau filiforme apparaît avant 2 minutes, l'urine est diluée 2 fois, si elle est large - 4 fois, si elle est compacte - 8 fois, etc. La concentration en protéines est calculée en multipliant 0,033 par le degré de dilution et exprimée en grammes pour 1 litre (g/l).

Parfois, un anneau blanc est obtenu en présence de grandes quantités d'urate. Contrairement au cycle protéique, le cycle urate apparaît légèrement au-dessus de la limite entre les deux liquides et se dissout lors d’un léger chauffage.

Détermination quantitative des protéines dans l'urine par la turbidité formée par l'ajout d'acide sulfosalicylique :

Principe de la méthode :

L'intensité de la turbidité lors de la coagulation des protéines avec l'acide sulfosalicylique est proportionnelle à sa concentration.

Réactifs requis :

1. Solution à 3% d'acide sulfosalicylique.

2. Solution de chlorure de sodium à 0,9 %.

3. Solution étalon d'albumine - Solution à 1 % (solution 1 ml contenant 10 mg d'albumine) : 1 g d'albumine lyophilisée (de sérum humain ou bovin) est dissous dans une petite quantité de solution de chlorure de sodium à 0,9 % dans un flacon d'une contenance de 100 ml, puis diluez au trait avec la même solution. Le réactif est stabilisé par ajout de 1 ml d'une solution d'azoture de sodium à 5 % (NaN3). Conservé au réfrigérateur, le réactif est valable 2 mois.

Équipement spécial - colorimètre photoélectrique.

Avancement de l'étude :

Ajouter 1,25 ml d'urine filtrée dans un tube à essai, ajouter à 5 ml une solution à 3 % d'acide sulfosalicylique et mélanger. Après 5 minutes, ils sont mesurés sur un photoélectrocolorimètre à une longueur d'onde de 590-650 nm (filtre orange ou rouge) contre un contrôle dans une cuvette de trajet optique de 5 mm. Le contrôle est un tube à essai dans lequel une solution de chlorure de sodium à 0,9 % a été ajoutée à 1,25 ml d'urine filtrée à 5 ml. Le calcul est effectué selon la courbe d'étalonnage, pour la construction de laquelle des dilutions sont préparées à partir de la solution étalon, comme indiqué dans le tableau.

De chaque solution obtenue, 1,25 ml sont prélevés et traités comme échantillons expérimentaux.

La dépendance linéaire lors de la construction d'un graphique d'étalonnage est maintenue jusqu'à 1 g/l. À des concentrations plus élevées, l'échantillon doit être dilué et la dilution prise en compte dans le calcul.

Des résultats faussement positifs peuvent être obtenus si des produits de contraste contenant de l'iode organique sont présents dans l'urine. Par conséquent, le test ne peut pas être utilisé chez les personnes prenant des suppléments d’iode ; Un résultat faussement positif peut également être dû à l’utilisation de sulfamides, de fortes doses de pénicilline et de concentrations élevées d’acide urique dans l’urine.

Méthode Biuret :

Principe de la méthode :

Les liaisons peptidiques des protéines avec les sels de cuivre en milieu alcalin forment un complexe violet. Les protéines sont précipitées avec de l'acide trichloroacétique.

Réactifs requis :

1. solution à 10 % acide trichloroacetic.
2. Solution de cuivre à 20 % (CuSO4∙5H2O).
3. Solution NaOH à 3 %.

Avancement de l'étude :

À 5 ml d'urine prélevée montant quotidien, ajouter 3 ml de solution d'acide trichloroacétique, centrifuger jusqu'à volume constant de sédiment. Le surnageant est aspiré à la pipette, le précipité est ensuite dissous dans 5 ml de solution de NaOH. 0,25 ml de CuSO4 sont ajoutés à la solution, le mélange est agité et centrifugé. Le liquide surnageant est photométrique à une longueur d'onde de 540 nm dans une cuvette avec un trajet optique de 10 mm contre de l'eau distillée. La concentration en protéines est calculée à l'aide d'une courbe d'étalonnage, lors de sa construction, la concentration en protéines (g/l) est portée sur l'axe des ordonnées, et la densité optique en unités d'extinction est portée sur l'axe des abscisses. Sur la base de la concentration obtenue, la perte quotidienne de protéines dans l'urine est calculée.

Utilisation de papier indicateur (bandes) :

Les protéines peuvent être détectées à l'aide de papier indicateur (bandes) produit par Albuphan, Ames (Angleterre), Albustix, Boehringer (Allemagne), Comburtest, etc.

Le principe est basé sur le phénomène dit d'erreur protéique de certains indicateurs acido-basiques. La partie indicatrice du papier est imprégnée de bleu de tétrabromophénol et de tampon citrate. Lorsque le papier est humidifié, le tampon se dissout et fournit le pH approprié pour la réaction de l'indicateur.

À 3,0-3,5, les groupes aminés des protéines réagissent avec l'indicateur et changent sa couleur initialement jaune en bleu verdâtre, après quoi, en comparant avec une échelle de couleurs, on peut estimer approximativement la concentration en protéines dans l'urine testée. Principe de base bon fonctionnement Les bandelettes indicatrices doivent garantir un pH compris entre 3,0 et 3,5 pour que la réaction se produise.

Si le papier est en contact avec l'urine testée plus longtemps que l'exposition spécifiée dans les instructions, le tampon citrate s'y dissout, puis l'indicateur réagit au véritable pH de l'urine, c'est-à-dire donne une réaction faussement positive. Étant donné que la capacité tampon est limitée, même si instructions méthodologiques des échantillons d'urine trop alcalins (pH > 6,5) donneront des résultats faussement positifs, et des échantillons d'urine trop acides (pH > 6,5) donneront des résultats faussement positifs, et des échantillons d'urine trop acides (pH > 6,5) donneront des résultats faussement positifs.
Le nombre de groupes aminés réactifs dans la composition des protéines individuelles est différent, de sorte que les albumines réagissent 2 fois plus intensément que la même quantité de y-globulines (protéine de Bence-Jones, paraprotéines) et beaucoup plus intensément que les glycoprotéines. Cependant, avec une grande quantité de mucus avec contenu élevé glycoprotéines (en cas d'inflammation des voies urinaires), des flocons de mucus se déposant sur la bandelette indicatrice peuvent donner des résultats faussement positifs.

La sensibilité des différents lots de production de papier indicateur, ainsi que des différents types de papier produits par la même entreprise, peut être différente, par conséquent quantification les protéines par cette méthode doivent être traitées avec prudence. Il est impossible de déterminer la perte quotidienne de protéines dans l'urine à l'aide de papier indicateur. Ainsi, le papier indicateur est inférieur aux tests chimiques, principalement le test à l'acide sulfosalicylique, bien qu'il permette d'étudier rapidement une série d'échantillons.

Détection de la protéine Bence Jones dans les urines :

La protéine Bence-Jones peut être excrétée dans les urines en cas de myélome multiple, la macroglobulinémie de Waldenström.

Il est conseillé de réaliser l'étude uniquement si le test à l'acide sulfosalicylique est positif. Le papier indicateur ne convient pas à la détection de la protéine Bence Jones.

Principe:

Basé sur la réaction de thermoprécipitation. Les méthodes qui évaluent la dissolution de la protéine Bence-Jones à une température de 100 °C ou la re-précipitation lors d'un refroidissement ultérieur ne sont pas fiables, car tous les corps protéiques de Bence-Jones n'ont pas les propriétés correspondantes. La détection la plus fiable de cette paraprotéine se fait par précipitation à une température de 40-60°C, mais même dans ces conditions, la précipitation peut ne pas se produire dans des urines trop acides (pH 6,5), à basse température. densité relative urine et de faibles concentrations de protéines Bence Jones.

Réactifs requis :

Tampon acétate 2 M pH 4,9.

Avancement de l'étude :

L'urine filtrée en quantité de 4 ml est mélangée avec 1 ml de tampon et chauffée pendant 15 minutes dans un bain-marie à une température de 56 °C. En présence de protéines de Bence-Jones, un précipité prononcé apparaît en 2 minutes ; si la concentration en protéine de Bence-Jones est inférieure à 3 g/l, l'échantillon peut s'avérer négatif. En pratique, cela est extrêmement rare, car la concentration de protéine de Bence Jones dans les urines est généralement importante.

En toute certitude, la protéine Bence Jones peut être détectée par recherche immunoélectrophorétique utilisant des sérums spécifiques contre les chaînes lourdes et légères des immunoglobulines.

Définition de l’albumose (protéose) :

Les albumoses sont des produits de dégradation des protéines dont le principe de détermination repose sur le fait qu'elles ne coagulent pas à l'ébullition, mais donnent une réaction de biuret positive et sont relarguées avec certains sels, notamment le sulfate d'ammonium et l'acétate de zinc dans un environnement acide.

L'urine normale ne contient pas d'albumose. Des traces peuvent être présentes urine normale en cas de mélange de liquide séminal. En pathologie, des albumoses peuvent survenir dans les urines lors d'états fébriles, de transfusions sanguines et plasmatiques, de résorption d'exsudats et de transsudats et de désintégration de tumeurs.

Réactifs requis :

1. Solution saturée de chlorure de sodium.
2. Solution concentrée d'hydroxyde de sodium.
3. Une solution faible de sulfate de cuivre (presque incolore).

Avancement de l'étude :

Une solution saturée de chlorure de sodium (1/3 de volume) est ajoutée à l'urine acidifiée avec de l'acide acétique, bouillie et le liquide chaud est filtré. Les albums passent dans le filtrat dans lequel leur présence est déterminée par la réaction du biuret. Au filtrat, ajoutez 1/2 volume d'une solution concentrée d'hydroxyde de sodium et quelques gouttes d'une solution faible de sulfate de cuivre. Un test positif donne une couleur rouge-violet.

Si le test à l'acide sulfosalicylique est positif, l'urine est chauffée. Si la turbidité disparaît et réapparaît une fois refroidie, cela signifie que l'urine contient de l'albumose ou du corps protéique de Bence-Jones.

De petites quantités de protéines se trouvent dans l’urine des 24 heures chez les individus en bonne santé. Cependant, de si faibles concentrations ne peuvent pas être détectées à l’aide des méthodes de recherche conventionnelles. La libération de plus grandes quantités de protéines, à laquelle les tests qualitatifs habituels de détection des protéines dans l'urine deviennent positifs, est appelée protéinurie. Il existe une protéinurie rénale (vraie) et extrarénale (fausse). Avec la protéinurie rénale, les protéines pénètrent dans l'urine directement à partir du sang en raison d'une filtration accrue par les glomérules du rein ou d'une diminution de la réabsorption tubulaire.

Protéinurie rénale (vraie)

La protéinurie rénale (vraie) peut être fonctionnelle ou organique. Parmi la protéinurie rénale fonctionnelle, les types suivants sont le plus souvent observés :

Protéinurie physiologique du nouveau-né, qui disparaît du 4e au 10e jour après la naissance, et un peu plus tard chez les prématurés ;
- l'albuminurie orthostatique, typique des enfants âgés de 7 à 18 ans et n'apparaissant qu'en position verticale du corps ;
- albuminurie transitoire (accident vasculaire cérébral), dont la cause peut être diverses maladies du système digestif, une anémie sévère, des brûlures, des blessures ou facteurs physiologiques: lourd exercice de stress, hypothermie, émotions fortes, alimentation abondante et riche en protéines, etc.

Une protéinurie organique (rénale) est observée en raison du passage des protéines du sang à travers zones endommagées endothélium des glomérules rénaux dans les maladies rénales (glomérulonéphrite, néphrose, néphrosclérose, amylose, néphropathie de la grossesse), troubles de l'hémodynamique rénale (hypertension veineuse rénale, hypoxie), effets trophiques et toxiques (y compris médicinaux) sur les parois des capillaires glomérulaires.

(fausse) protéinurie extrarénale

(fausse) protéinurie extrarénale, dans laquelle la source de protéines dans l'urine est un mélange de leucocytes, d'érythrocytes, de bactéries et de cellules urothéliales. observé dans les maladies urologiques ( maladie de lithiase urinaire, tuberculose rénale, tumeurs des reins et des voies urinaires, etc.).

Détermination des protéines dans l'urine

La plupart des méthodes qualitatives et quantitatives de dosage des protéines dans les urines reposent sur leur coagulation dans le volume d'urine ou à l'interface de milieux (urine et acide).

Parmi les méthodes qualitatives de détermination du bek dans les urines, les plus largement utilisées sont le test unifié à l'acide sulfosalicylique et le test annulaire de Heller.

Un test standardisé à l'acide sulfasalicylique est réalisé comme suit. 3 ml d'urine filtrée sont versés dans 2 tubes à essai. 6 à 8 gouttes d'une solution à 20 % d'acide sulfasalicylique sont ajoutées à l'un d'eux. Les deux tubes à essai sont comparés sur un fond sombre. Une urine trouble dans un tube à essai contenant de l'acide sulfasalicylique indique la présence de protéines. Avant l'étude, il est nécessaire de déterminer la réaction urinaire et, si elle est alcaline, de l'acidifier avec 2-3 gouttes d'une solution d'acide acétique à 10%.

Le test de Heller est basé sur le fait qu'en présence de protéines dans l'urine, une coagulation se produit à la frontière de l'acide nitrique et de l'urine et un anneau blanc apparaît. 1 à 2 ml d'une solution d'acide nitrique à 30 % sont versés dans un tube à essai et exactement la même quantité d'urine filtrée est soigneusement déposée le long de la paroi du tube à essai. L’apparition d’un anneau blanc à la frontière de deux liquides indique la présence de protéines dans les urines. Il ne faut pas oublier que parfois un anneau blanc se forme lorsqu'il y a grande quantité urates, mais contrairement au cycle protéique, il apparaît légèrement au-dessus de la frontière entre deux liquides et se dissout lorsqu'il est chauffé [Pletneva N.G., 1987].

Les méthodes quantitatives les plus couramment utilisées sont :

1) la méthode unifiée de Brandberg-Roberts-Stolnikov, basée sur le test annulaire de Heller ;
2) méthode photoélectrocolorimétrique pour la détermination quantitative des protéines dans l'urine par la turbidité formée par l'ajout d'acide sulfasalicylique ;
3) méthode biuret.

Détection simplifiée des protéines dans les urines méthode accélérée réalisée selon la méthode colorimétrique à l'aide de papier indicateur produit par Lachema (Slovaquie), Albuphan, Ames (Angleterre), Albustix, Boehringer (Allemagne), Comburtest, etc. La méthode consiste en une immersion dans une urine spéciale bande de papier, imprégné de bleu de tétrabromophénol et de tampon citrate, qui change de couleur du jaune au bleu en fonction de la teneur en protéines de l'urine. La concentration approximative de protéines dans l'urine testée est déterminée à l'aide d'une échelle standard. Pour obtenir résultats corrects doit être observé conditions suivantes. Le pH urinaire doit être compris entre 3,0 et 3,5 ; quand aussi urine alcaline(pH 6,5) un résultat faussement positif sera obtenu, et si l'urine est trop acide (pH 3,0) un résultat faussement négatif sera obtenu.

Le papier ne doit pas être en contact avec l'urine testée plus longtemps que celui indiqué dans les instructions, sinon le test donnera une réaction faussement positive. Ce dernier s'observe également lorsqu'il y a une grande quantité de mucus dans les urines. Sensibilité divers types et les séries de documents peuvent varier, c'est pourquoi la quantification des protéines dans l'urine par cette méthode doit être traitée avec prudence. Il est impossible de déterminer sa quantité dans l'urine quotidienne à l'aide de papier indicateur [Pletneva N.G., 1987]

Détermination de la protéinurie quotidienne

Il existe plusieurs façons de déterminer la quantité de protéines excrétée dans l'urine par jour. La plus simple est la méthode Brandberg-Roberts-Stolnikov.

Méthodologie. 5 à 10 ml d'urine quotidienne soigneusement mélangée sont versés dans un tube à essai et une solution d'acide nitrique à 30 % est soigneusement ajoutée le long de ses parois. S'il y a des protéines dans l'urine à raison de 0,033 % (soit 33 mg pour 1 litre d'urine), un anneau blanc fin mais bien visible apparaît après 2-3 minutes. A une concentration plus faible, l'échantillon est négatif. S'il y a une teneur plus élevée en protéines dans l'urine, sa quantité est déterminée par des dilutions répétées de l'urine avec de l'eau distillée jusqu'à ce qu'un anneau cesse de se former. Dans le dernier tube à essai, dans lequel l'anneau est encore visible, la concentration en protéines sera de 0,033 %. En multipliant 0,033 par le degré de dilution de l'urine, la teneur en protéines dans 1 litre d'urine non diluée est déterminée en grammes. Ensuite, la teneur en protéines dans l'urine quotidienne est calculée à l'aide de la formule :

K=(xV)/1000

Où K est la quantité de protéines dans l'urine quotidienne (g) ; x - quantité de protéines dans 1 litre d'urine (g) ; V est la quantité d'urine excrétée par jour (ml).

Normalement, de 27 à 150 mg (en moyenne 40 à 80 mg) de protéines sont excrétés dans l'urine au cours de la journée.

Ce test permet de déterminer uniquement les protéines finement dispersées (albumine) dans l'urine. Les méthodes quantitatives plus précises (méthode colorimétrique de Kjeldahl, etc.) sont assez complexes et nécessitent un équipement spécial.

Avec la protéinurie rénale, non seulement l'albumine, mais également d'autres types de protéines sont excrétés dans l'urine. Un protéinogramme normal (selon Seitz et al., 1953) a le pourcentage suivant : albumine - 20 %, α 1 -globulines - 12 %, α 2 -globulines - 17 %, γ-globulines - 43 % et β-globulines - 8% . Le rapport albumines/globulines change dans diverses maladies rénales, c'est-à-dire la relation quantitative entre les fractions protéiques est perturbée.

Les méthodes les plus courantes de fractionnement des uroprotéines sont les suivantes : relargage avec des sels neutres, fractionnement électrophorétique, méthodes immunologiques (réaction d'immunodiffusion radiale de Mancini, analyse immunoélectrophorétique, immunoélectrophorèse par précipitation), chromatographie, filtration sur gel et ultracentrifugation.

Dans le cadre de l'introduction de méthodes de fractionnement des uroprotéines basées sur l'étude de la mobilité électrophorétique, de la variabilité du poids moléculaire, de la taille et de la forme des molécules d'uroprotéines, il est devenu possible d'identifier les types de protéinurie caractéristiques d'une maladie particulière et d'étudier les clairances plasmatiques individuelles. protéines. À ce jour, plus de 40 protéines plasmatiques ont été identifiées dans l’urine, dont 31 protéines plasmatiques dans l’urine normale.

Protéinurie sélective

Ces dernières années, le concept de sélectivité de la protéinurie a émergé. En 1955, Hardwicke et Squire ont formulé le concept de protéinurie « sélective » et « non sélective », déterminant que la filtration des protéines plasmatiques dans l'urine suit un certain schéma : plus le poids moléculaire de la protéine excrétée dans l'urine est élevé, plus moins sa clairance est faible et plus sa concentration dans l'urine finale est faible. La protéinurie correspondant à ce schéma est sélective, contrairement à la protéinurie non sélective, caractérisée par une perversion du schéma dérivé.

La détection de protéines de poids moléculaire relativement élevé dans l'urine indique un manque de sélectivité du filtre rénal et ses graves dommages. Dans ces cas, on parle d'une faible sélectivité de la protéinurie. Par conséquent, la détermination des fractions protéiques de l'urine à l'aide des méthodes d'électrophorèse sur gel d'amidon et de polyacrylamide est désormais largement répandue. Sur la base des résultats de ces méthodes de recherche, on peut juger de la sélectivité de la protéinurie.

Selon V.S. Makhlina (1975), le plus justifié est de déterminer la sélectivité de la protéinurie en comparant les clairances de 6 à 7 protéines plasmatiques individuelles (albumine, tranéferrine, α 2 - macroglobuline, IgA, IgG, IgM) en utilisant des méthodes précises et spécifiques. méthodes immunologiques quantitatives de réaction d'immunodiffusion radiale selon Mancini, analyse immunoélectrophorétique et immunoélectrophorèse précipitée. Le degré de sélectivité de la protéinurie est déterminé par l'indice de sélectivité, qui est le rapport entre les protéines comparées et de référence (albumine).

L'étude des clairances de protéines plasmatiques individuelles permet d'obtenir des informations fiables sur l'état des membranes basales de filtration des glomérules du rein. Le lien entre la nature des protéines excrétées dans l'urine et les modifications des membranes basales glomérulaires est si prononcé et constant que l'uroprotéinogramme peut indirectement juger des modifications physiopathologiques des glomérules des reins. Bien la taille moyenne la taille des pores de la membrane basale glomérulaire est de 2,9-4 A° NM, qui peuvent laisser passer des protéines d'un poids moléculaire allant jusqu'à 10 4 (myoglobuline, α 1 acide - glycoprotéine, chaînes légères d'immunoglobulines, Fc et Fab - fragments d'IgG , albumine et transferrine).

Avec la glomérulonéphrite et le syndrome néphrotique, la taille des pores des membranes basales des glomérules augmente et la membrane basale devient donc perméable aux molécules protéiques grande taille et de masse (céruloplasmine, haptoglobine, IgG, IgA, etc.). Avec des dommages extrêmes aux glomérules des reins, des molécules géantes de protéines du plasma sanguin (α 2 -macroglobuline, IgM et β 2 -lipoprotéine) apparaissent dans l'urine.

En déterminant le spectre protéique de l’urine, on peut conclure que certaines zones du néphron sont majoritairement touchées. La glomérulonéphrite avec lésions prédominantes des membranes basales glomérulaires est caractérisée par la présence de protéines de poids moléculaire élevé et moyen dans l'urine. La pyélonéphrite avec lésions prédominantes des membranes basales des tubules est caractérisée par l'absence de poids moléculaire élevé et la présence montants augmentés protéines de poids moléculaire moyen et faible.

β 2 -Microglobuline

En plus des protéines bien connues comme l'albumine, les immunoglobulines, les lipoprotéines. fibrinogène, transferrine, l'urine contient des protéines microprotéiques plasmatiques, parmi lesquelles la β 2 -microglobuline, découverte par Berggard et Bearn en 1968, présente un intérêt clinique. Ayant un faible poids moléculaire (poids moléculaire relatif 1800), elle passe librement à travers les glomérules du rein et presque complètement réabsorbé dans les tubules proximaux. Cela permet la détermination quantitative de la β 2 -microglobuline dans le sang et l'urine pour déterminer le taux de filtration glomérulaire et la capacité des reins à résorber les protéines dans les tubules proximaux.

La concentration de cette protéine dans le plasma sanguin et les urines est déterminée par méthode radio-immunologique à l'aide du kit standard « Phade-bas β 2 -mikroiest » (Pharmacia, Suède). Le sérum sanguin des personnes en bonne santé contient en moyenne 1,7 mg/l (intervalles de 0,6 à 3 mg/l) et l'urine contient en moyenne 81 μg/l (maximum 250 μg/l) de β 2 -microglobuline. Le dépassement dans les urines de plus de 1000 mcg/l est un phénomène pathologique. La teneur en β 2 -microglobuline dans le sang augmente dans les maladies accompagnées d'une filtration glomérulaire altérée, en particulier dans la glomérulonéphrite aiguë et chronique, la polykystose rénale, la néphrosclérose, la néphropathie diabétique, l'insuffisance rénale aiguë.

La concentration de β 2 -microglobuline dans l'urine augmente dans les maladies accompagnées d'une altération de la fonction de réabsorption des tubules, ce qui entraîne une augmentation de 10 à 50 fois de son excrétion dans l'urine, en particulier en cas de pyélonéphrite, d'insuffisance rénale chronique, purulente. intoxication, etc. Il est caractéristique qu'avec la cystite, contrairement à la pyélonéphrite, il n'y a pas d'augmentation de la concentration de β 2 -microglobuline dans l'urine, ce qui peut être utilisé pour le diagnostic différentiel de ces maladies. Cependant, lors de l'interprétation des résultats de l'étude, il faut tenir compte du fait que toute augmentation de la température s'accompagne toujours d'une augmentation de l'excrétion de β 2 -microglobuline dans l'urine.

Molécules moyennes de sang et d'urine

Les molécules moyennes (MM), autrement appelées toxines protéiques, sont des substances dont le poids moléculaire est compris entre 500 et 5 000 daltons. Structure physique le leur est inconnu. La composition du SM comprend au moins 30 peptides : ocytocine, vasopressine, angiotensine, glucagon, hormone adrénocorticotrope (ACTH), etc. Une accumulation excessive de SM est observée avec une diminution de la fonction rénale et une grande quantité de protéines déformées et de leurs métabolites dans le sang. Ils ont un effet biologique diversifié et sont neurotoxiques, provoquent une immunosuppression secondaire, une anémie secondaire, inhibent la biosynthèse des protéines et l'érythropoïèse, inhibent l'activité de nombreuses enzymes et perturbent les phases du processus inflammatoire.

Le taux de SM dans le sang et les urines est déterminé par un test de dépistage, ainsi que par spectrophotométrie dans la zone ultraviolette aux longueurs d'onde de 254 et 280 mm sur un spectrophotomètre DI-8B, ainsi que par spectrophotométrie dynamique avec traitement informatique dans la gamme de longueurs d'onde. 220-335 nm sur le même spectromètre de Beckman. La teneur en SM dans le sang est considérée comme la norme égale à 0,24 ± 0,02 arb. unités, et dans l'urine - 0,312 ± 0,09 arb. unités
Étant des déchets normaux de l'organisme, ils en sont normalement éliminés la nuit par filtration glomérulaire à hauteur de 0,5 % ; 5 % d’entre eux sont éliminés autrement. Toutes les fractions SM subissent une réabsorption tubulaire.

Uroprotéines non plasmatiques (tissus)

En plus des protéines plasmatiques sanguines, l'urine peut contenir des protéines non plasmatiques (tissus). Selon Buxbaum et Franklin (1970), les protéines non plasmatiques représentent environ les 2/3 de tous les biocolloïdes urinaires et une partie importante des uroprotéines dans la protéinurie pathologique. Les protéines tissulaires pénètrent dans l'urine directement à partir des reins ou des organes anatomiquement associés aux voies urinaires, ou pénètrent dans le sang à partir d'autres organes et tissus, et de celui-ci à travers les membranes basales des glomérules du rein dans l'urine. Dans ce dernier cas, l'excrétion des protéines tissulaires dans l'urine se produit de la même manière que l'excrétion des protéines plasmatiques de différents poids moléculaires. La composition des uroprotéines non plasmatiques est extrêmement diversifiée. Parmi eux figurent les glycoprotéines, les hormones, les antigènes et les enzymes.

Les protéines tissulaires dans l'urine sont détectées à l'aide de méthodes conventionnelles de chimie des protéines (ultracentrifugation, chromatographie sur gel, diverses optionsélectrophorèse), réactions spécifiques aux enzymes et hormones et méthodes immunologiques. Ces dernières permettent également de déterminer la concentration d'uroprotéines non plasmatiques dans les urines et, dans certains cas, de déterminer les structures tissulaires qui sont devenues la source de son apparition. La principale méthode de détection des protéines non plasmatiques dans l'urine est l'analyse par immunodiffusion avec un antisérum obtenu en immunisant des animaux de laboratoire avec de l'urine humaine et ensuite appauvri (adsorbé) par les protéines du plasma sanguin.

Etude des enzymes dans le sang et l'urine

Au cours du processus pathologique, on observe de profondes perturbations des fonctions vitales des cellules, accompagnées de la libération d'enzymes intracellulaires dans les fluides corporels. Le diagnostic enzymatique repose sur la détermination d'un certain nombre d'enzymes libérées par les cellules des organes affectés et non caractéristiques du sérum sanguin.
Des études sur le néphron humain et animal ont montré qu'il existe dans ses parties individuelles une différenciation enzymatique élevée, étroitement liée aux fonctions remplies par chaque section. Les glomérules du rein contiennent relativement une petite quantité de diverses enzymes.

Les cellules des tubules rénaux, en particulier les parties proximales, contiennent le maximum d'enzymes. Leur forte activité est observée dans l'anse de Henle, les tubules droits et les canaux collecteurs. Les modifications de l'activité d'enzymes individuelles dans diverses maladies rénales dépendent de la nature, de la gravité et de la localisation du processus. Ils sont observés avant l'apparition de modifications morphologiques au niveau des reins. Étant donné que le contenu de diverses enzymes est clairement localisé dans le néphron, la détermination de l'une ou l'autre enzyme dans l'urine peut contribuer au diagnostic topique du processus pathologique dans les reins (glomérules, tubules, cortex ou moelle), au diagnostic différentiel de maladies rénales et détermination de la dynamique (atténuation et exacerbation) du processus dans le parenchyme rénal.

Pour le diagnostic différentiel des maladies des organes système génito-urinaire L'activité des enzymes suivantes dans le sang et l'urine est déterminée : lactate déshydrogénase (LDH), leucine aminopeptidase (LAP), phosphatase acide (AP), phosphatase alcaline (ALP), β-glucuronidase, transaminase glutamique-oxaloacétique (GAST), aldolase, transamidinase, etc. L'activité enzymatique dans le sérum sanguin et l'urine est déterminée à l'aide de méthodes biochimiques, spectrophotométriques, chromatographiques, fluorimétriques et chimioluminescentes.

L'enzymurie dans les maladies rénales est plus prononcée et naturelle que l'enzymemie. Elle est particulièrement prononcée au stade aigu de la maladie ( pyélonéphrite aiguë, traumatisme, désintégration tumorale, infarctus du rein, etc.). Dans ces maladies, une activité élevée des transamidinase, LDH, ALP et CP, hyaluronidase, LAP, ainsi que des enzymes non spécifiques telles que GSH, catalase est détectée [Polyantseva L.R., 1972].

La localisation sélective des enzymes dans le néphron lors de la détection de la PAP et de l'ALP dans l'urine nous permet de parler avec confiance des cas aigus et maladies chroniques reins (insuffisance rénale aiguë, nécrose des tubules rénaux, glomérulonéphrite chronique) [Shemetov V.D., 1968]. Selon A.A. Karelin et L.R. Polyantseva (1965), la transamidinase n'est contenue que dans deux organes : le rein et le pancréas. C'est une enzyme mitochondriale des reins et est normalement absente du sang et de l'urine. Dans diverses maladies rénales, les transamidinases apparaissent dans le sang et l'urine, et en cas de lésions du pancréas, uniquement dans le sang.

Krotkiewski (1963) considère l'activité de la phosphatase alcaline dans l'urine comme un test différentiel dans le diagnostic de la glomérulonéphrite et de la pyélonéphrite, dont l'augmentation est plus typique de la pyélonéphrite et de la glomérulosclérose diabétique que de la néphrite aiguë et chronique. L'amylasémie augmentant en dynamique avec une diminution simultanée de l'amylasurie peut indiquer une néphrosclérose et un rétrécissement des reins, le PAP a valeur la plus élevée avec des changements pathologiques dans les glomérules et les tubules contournés du rein, car son contenu dans ces parties du néphron est plus élevé [Shepotinovsky V.P. et al., 1980]. Pour diagnostiquer la néphrite lupique, il est recommandé de déterminer la β-glucuronidase et la CP [Privalenko M.N. et al., 1974].

Lors de l'évaluation du rôle de l'enzymurie dans le diagnostic des maladies rénales, les points suivants doivent être pris en compte. Les enzymes, étant des protéines par nature, de faible poids moléculaire, peuvent traverser des glomérules intacts, déterminant ce qu'on appelle l'enzymurie physiologique. Parmi ces enzymes, l'α-amylase (poids moléculaire relatif 45 000) et l'uropepsine (poids moléculaire relatif 38 000) sont constamment détectées dans les urines.

Outre les enzymes de faible poids moléculaire, d'autres enzymes peuvent être trouvées en faibles concentrations dans l'urine d'individus sains : LDH, aspartate et alanine aminotransférases, ALP et CP, maltase, aldolase, lipase, diverses protéases et peptidases, sulfatase, catalase, ribonucléase, peroxydase.

Selon Richterich (1958) et Hess (1962), les enzymes de haut poids moléculaire ayant un poids moléculaire relatif supérieur à 70 000-100 000 ne peuvent pénétrer dans l'urine que si la perméabilité du filtre glomérulaire est altérée. La teneur normale en enzymes dans l'urine ne permet pas d'exclure un processus pathologique dans le rein dû à l'occlusion de l'uretère. Avec l'épzymurie, les enzymes peuvent être libérées non seulement par les reins eux-mêmes, mais également par d'autres organes parenchymateux, par les cellules des muqueuses des voies urinaires, de la prostate, ainsi que par les éléments formés de l'urine en cas d'hématurie ou de leucocyturie.

La plupart des enzymes ne sont pas spécifiques au rein, il est donc difficile de déterminer d’où proviennent les enzymes présentes dans l’urine des personnes en bonne santé et des personnes malades. Cependant, le degré d'enzymurie, même pour les enzymes non spécifiques dans les lésions rénales, est supérieur à la normale ou à celui observé dans les maladies d'autres organes. Des informations plus précieuses peuvent être fournies par une étude approfondie de la dynamique d'un certain nombre d'enzymes, en particulier celles spécifiques à un organe, telles que les transaminases.

Pour résoudre la question de l'origine rénale de l'enzyme dans l'urine, l'étude des isoenzymes avec l'identification des fractions typiques de l'organe étudié est utile. Les isoenzymes sont des enzymes à action isogénique (catalysant la même réaction), mais hétérogènes dans leur action. structure chimique et d'autres propriétés. Chaque tissu possède un spectre d'isoenzymes caractéristique. Les méthodes utiles pour séparer les isoenzymes sont l'électrophorèse sur gel d'amidon et de polyacrylamide, ainsi que la chromatographie par échange d'ions.

Protéine de Bence Jones

Dans le myélome multiple et la macroglobulinémie de Waldenström, la protéine de Bence-Jones est détectée dans les urines. La méthode de détection de la protéine nommée dans l'urine est basée sur la réaction de thermoprécipitation. Les méthodes précédemment utilisées qui évaluent la dissolution de cette protéine à une température de 100 °C et sa re-précipitation lors d'un refroidissement ultérieur ne sont pas fiables, car tous les corps protéiques de Bence-Jones n'ont pas les propriétés correspondantes.

Il est plus fiable de détecter cette paraprotéine en la précipitant à une température de 40 -60°C. Cependant, même dans ces conditions, les précipitations peuvent ne pas se produire à des températures trop acides (pH< 3,0—3,5) или слишком щелочной (рН >6.5) urine, avec un faible TPR et une faible concentration de protéine Bence-Jones. Les conditions les plus favorables à sa précipitation sont assurées par la méthode proposée par Patnem : 4 ml d'urine filtrée sont mélangés avec 1 ml de tampon acétate 2 M pH 4,9 et chauffés pendant 15 minutes au bain-marie à une température de 56°C. En présence de protéine Bence Jones, un précipité prononcé apparaît dans les 2 premières minutes.

Si la concentration de protéine de Bence Jones est inférieure à 3 g/l, le test peut être négatif, mais en pratique cela est extrêmement rare, puisque sa concentration dans les urines est généralement plus importante. Les tests d'ébullition ne peuvent pas être entièrement fiables. En toute certitude, il peut être détecté dans les urines par méthode immuno-électrophorétique à l'aide de sérums spécifiques contre les chaînes lourdes et légères des immunoglobulines.

La méthode Brandberg – Roberts – Stolnikov fait référence à des méthodes semi-quantitatives permettant de déterminer les protéines totales dans l'urine. La méthode est basée sur le test annulaire de Heller, qui consiste dans le fait qu'à la frontière de l'acide nitrique et de l'urine, en présence de protéines, celle-ci coagule et un anneau blanc apparaît.

Réactifs

Solution d'acide nitrique à 50 % ou Le réactif de Larionova.
Préparation du réactif de Larionova : préparer une solution saturée de chlorure de sodium (20 à 30 g de sel sont dissous dans 100 ml d'eau lorsqu'ils sont chauffés, laisser reposer jusqu'à refroidissement). Le liquide surnageant est égoutté et filtré. A 99 ml de filtrat, ajoutez 1 ml d'acide nitrique concentré. Au lieu de l'acide nitrique, vous pouvez ajouter 2 ml d'acide chlorhydrique concentré.

Progrès de la détermination

1 à 2 ml d'acide nitrique (ou de réactif larionique) sont versés dans le tube à essai, l'acide peut s'écouler des parois du tube à essai (5 à 8 minutes), sinon, lorsque l'urine protéique est superposée, une turbidité se formera en raison du mélange de l'acide nitrique sur les parois du tube à essai avec l'urine, ce qui empêche la formation d'un anneau distinct. Par conséquent, vous devez d’abord préparer une série de tubes à essai avec de l’acide. À l’aide d’une pipette, étalez soigneusement la même quantité de liquide filtré le long de la paroi du tube à essai. urine claire, en prenant soin de ne pas agiter le liquide présent dans le tube à essai. L'apparition d'un fin anneau blanc à l'interface des deux liquides entre la 2ème et la 3ème minute indique la présence de protéines à une concentration d'environ 0,033 g/l. Le temps de superposition est calculé en quart de minute.

Si l'anneau apparaît moins de 2 minutes après la superposition, l'urine doit être diluée avec de l'eau et l'urine déjà diluée doit être à nouveau superposée. Le degré de dilution des urines est choisi en fonction du type d'anneau, c'est-à-dire sa largeur, sa compacité et son moment d'apparition. Si un anneau filiforme apparaît avant 2 minutes, l'urine est diluée 2 fois, si elle est large - 4 fois, si elle est compacte - 8 fois, etc. La dilution de l'urine se fait dans un tube à centrifuger doseur, en versant l'urine dans jusqu'au repère 1 ml et en ajoutant de l'eau jusqu'au repère en fonction du nombre de fois où la dilution est effectuée. Le contenu du tube à essai est soigneusement mélangé avec une pipette Pasteur et un ballon. Si de la turbidité apparaît lors de la dilution de l'urine, le mélange doit être à nouveau filtré et seul le filtrat clair doit être recouvert d'acide nitrique. La concentration en protéines est calculée en multipliant 0,033 par le degré de dilution et exprimée en grammes par litre (g/l). Sélectionnez une dilution de l'urine telle que lorsqu'elle est superposée à de l'acide nitrique, un anneau apparaisse entre la 2e et la 3e minute.

Si un anneau se forme avec de l'urine non diluée ou diluée entre la 1ère et la 4ème minute, vous pouvez utiliser la correction d'Ehrlich-Althausen afin de ne pas diluer davantage l'urine (cela fait gagner du temps). Les auteurs ont proposé de déterminer l'heure d'apparition de l'anneau filiforme et d'introduire une correction temporelle dans le calcul. Dans ce cas, la quantité de protéines est calculée en multipliant 0,033 g/l par le degré de dilution et la correction.

Lorsqu'un anneau se forme, avant 1 minute, il est nécessaire de réaliser une dilution fractionnée, soit 1,5 fois (deux parts d'urine et 1 part d'eau). Cette dilution est également prise en compte lors du calcul de la quantité de protéines dans les urines.

Un exemple de détermination des protéines totales dans l'urine à l'aide de la méthode Brandberg-Roberts-Stolnikov.

Lorsque l’urine se dépose sur le réactif, un large anneau se forme immédiatement. Diluer l'urine 4 fois (1 partie d'urine + 3 parties d'eau), en couche ; Un anneau filiforme est immédiatement obtenu. Il est nécessaire de diluer encore 2 fois la dilution existante ; Lors de la superposition de cette dilution, un anneau se forme après 1,5 minutes. Il n’est pas nécessaire de poursuivre la reproduction.

Calcul des protéines : l'urine a été diluée 4 et 2 fois, donc 8 fois. La quantité de protéines est de 0,033*8*1 1/4 = 0,33 g/l

Inconvénients de la méthode Brandberg-Roberts-Stolnikov :

  • subjectivité,
  • l'intensité du travail,
  • diminution de la précision de la détermination de la concentration en protéines à mesure que l'urine est diluée.

Voir également:

Littérature:

  • Manuel "Méthodes de recherche en laboratoire en clinique" éd. prof. V.V. Menchikova. - Moscou, "Médecine", 1987
  • L. V. Kozlovskaya, A. Yu. Nikolaev. Didacticiel sur les méthodes de recherche en laboratoire clinique. Moscou, Médecine, 1985
  • A. Ya. Althauzen, « Diagnostic de laboratoire clinique » - Moscou, Medgiz, 1959
  • A. Ya. Lyubina, L. P. Ilyicheva et co-auteurs, « Études cliniques en laboratoire », Moscou, « Médecine », 1984

Cible– dosage des protéines dans les urines.

Les indications– états hypertendus pendant la grossesse, maladie rénale chez la femme enceinte

Contre-indications- Non.

Complications possibles - Non

Ressources– récipient, pot stérile, tubes à essai, acide sulfosalicylique à 30% ou acétique à 3%, pipette, brûleur à alcool.

Algorithme d'action :

1. Expliquez à la femme enceinte la nécessité de déterminer les protéines dans l'urine.

2. Demandez à la femme enceinte de recueillir l'urine dans un pot stérile.

3. Test avec de l'acide sulfosalicylique : versez 4 à 5 ml d'urine dans un tube à essai, ajoutez 6 à 10 gouttes d'acide. S'il y a des protéines dans l'urine, des sédiments ou un trouble se formeront.

4. Échantillon avec 3% d'acide acétique : verser 8 à 10 ml d'urine dans un tube à essai, faire bouillir sur un brûleur à alcool ; si l'urine contient des protéines, elle deviendra trouble. Ajoutez quelques gouttes d’une solution d’acide acétique à 3 % à une urine trouble. Si la turbidité disparaît dans les urines, le test est négatif.

REMARQUES Déterminé au service d'accueil d'une maternité.

Norme « Détermination de la date d’échéance prévue ».

Cible:évaluer les compétences pratiques du diplômé pour déterminer la date d’accouchement prévue

Les indications– toute visite à la maternité d'une femme enceinte.

Contre-indications- Non

Complications possibles- Non

Ressources– table, deux chaises, calendrier, calendrier obstétrical, informations écrites sur la date du premier jour La dernière période de menstruations, première visite à la clinique prénatale, date de l'échographie avec conclusion, date du congé prénatal

Algorithme d'action :

  1. Présentez-vous et expliquez à la femme l’importance de calculer la date prévue de l’accouchement.
  2. Renseignez-vous auprès de la femme enceinte le premier jour de la dernière menstruation, ajoutez 280 jours à cette date, ou selon la formule de Naegele, ajoutez 7 jours au 1er jour de la dernière menstruation et soustrayez 3 mois, la date obtenue est la date d'accouchement pour les menstruations.
  3. Découvrez la date du premier mouvement du fœtus, à ce jour pour une femme primipare ajoutez 140 jours et pour une femme multipare 154 jours, la date résultante est la date d'échéance du mouvement fœtal.
  4. Par cycle menstruel déterminer quel jour cela s'est produit dernière ovulation et à partir du premier jour de la dernière menstruation, comptez trois mois à rebours et ajoutez le nombre de jours jusqu'à l'ovulation, obtenez la date de naissance.
  5. Calculez votre date d'accouchement en fonction de votre première visite à la clinique prénatale. L'erreur sera minime si la femme enceinte a consulté un médecin au cours des 12 premières semaines de grossesse.
  6. Déterminez la date d'échéance en fonction de la date du congé prénatal. La période de congé prénatal commence à 30 semaines de grossesse. Ajoutez 10 semaines à cette date et obtenez la date d'échéance.
  7. Calculez la date d'accouchement à l'aide d'une échographie réalisée à la clinique prénatale.

Norme « Inspection des organes génitaux externes »

Cible:évaluer les compétences pratiques du diplômé lors de l’examen des organes génitaux externes d’une femme enceinte

Les indications– première visite à la maternité pour une femme enceinte, admission à l'hôpital avec travail régulier.

Contre-indications- Non

Complications possibles- Non

Ressources– femme fantôme, canapé, sous-vêtements jetables pour le canapé

Algorithme d'action :

1. Présentez-vous, expliquez à la femme l'importance de l'examen des organes génitaux externes, les étapes de sa mise en œuvre et obtenez son consentement

2. Effectuer une désinfection hygiénique des mains

3. Mettez des gants stériles sur les deux mains.

4. Inspectez les organes génitaux externes : évaluez le type de pousse des poils, la structure des grandes et petites lèvres, le clitoris et l'état du périnée.

5. À l'aide du pouce et de l'index des deux mains, écartez les grandes lèvres, examinez l'état de l'ouverture externe de l'urètre, le vestibule du vagin, palpez la zone des glandes de Bartholin (le tiers inférieur des grandes lèvres ).

6. Retirez les gants jetables et placez-les dans une boîte de mise au rebut sûre.

7. Lavez-vous les mains avec du savon.

8. Fournir à la femme enceinte des informations sur l'état des organes génitaux externes.

9. Prenez note dans la documentation.

NOTE L’examen est effectué de manière confidentielle, sans humilier la dignité de la femme.

Norme "Fournir assistance d'urgence pour l'éclampsie"

Cible:évaluer les compétences pratiques du diplômé en matière de prestation de soins d’urgence pour l’éclampsie

Les indications– crise de convulsions lors d’éclampsie

Contre-indications- Non

Complications possiblesattaque répétée convulsions, coma éclamptique.

Ressources– mannequin de femme, solution de sulfate de magnésium à 25 %, spatule, porte-langue, seringue de 20 ml, solution saline de 500 ml, système de perfusion intraveineuse, alcool, coton, garrot

Algorithme d'action :

1. En cas de convulsions, appeler tout le personnel disponible et l'équipe de réanimation sans quitter le patient.

2. Réalisez simultanément les activités suivantes :

· dégagez les voies respiratoires en ouvrant la bouche avec une spatule ou une cuillère enveloppée de gaze et étirez votre langue avec un porte-langue.

· retirer la salive de la bouche ; dès que vous inspirez, assurer le libre accès de l'air.

· après avoir arrêté les crises, administrer une dose initiale de sulfate de magnésium par voie intraveineuse – 25 % à 20 ml en 10 à 15 minutes.

3. Commencez une perfusion intraveineuse de 320 ml de solution saline avec 80 ml de solution de sulfate de magnésium à 25 %

4. Sous contrôle pression artérielle et poursuivre la thérapie au magnésium, transférer la patiente sur une civière et la transporter vers l'unité de soins intensifs de la maternité la plus proche.

NOTE

En cas d’éclampsie, l’accouchement doit avoir lieu une fois l’état de la patiente stabilisé, mais au plus tard 12 heures après le début des crises.

Norme « Fournir des soins d’urgence en cas de prééclampsie sévère ».

Cible:évaluer les compétences pratiques du diplômé dans la prestation de soins d’urgence en cas de prééclampsie sévère

Les indications– prééclampsie sévère

Contre-indications- lors d'une crise de convulsions

Complications possibles– crise de convulsions, coma éclamptique.

Ressources– mannequin de femme, solution de sulfate de magnésium à 25 %, seringue de 20 ml, solution saline de 500 ml, système de perfusion intraveineuse, alcool, coton, garrot

Algorithme d'action :

1. Poser un diagnostic : « Prééclampsie sévère » si l'un de ces symptômes est présent : maux de tête, douleurs dans la région épigastrique, vision floue, taches clignotantes devant les yeux, nausées, vomissements, sur fond d'hypertension artérielle (140/90 mm). Hg et plus) et protéinurie.

2. Appelez tout le personnel disponible et l'équipe de réanimation sans quitter le patient.

3. Réalisez simultanément les activités suivantes :

· Placez la femme enceinte sur une surface plane, en évitant les blessures, et tournez la tête de la patiente sur le côté.

· administrer par voie intraveineuse une dose initiale de sulfate de magnésium – 25 % à 20 ml en 10 à 15 minutes.

4. Commencez une perfusion intraveineuse de 320 ml de solution saline avec 80 ml de solution de sulfate de magnésium à 25 %.

5. Lorsque la tension artérielle est égale ou supérieure à 160/100 mmHg. réguler la tension artérielle en prescrivant 10 mg de nifédipine par voie sublinguale, puis à nouveau après 30 minutes 10 mg sous surveillance tensionnelle (maintenir la tension artérielle à 130/90-140/95 mmHg).

6. Sous contrôle de la tension artérielle et traitement continu au magnésium, transférer la patiente sur une civière et la transporter vers l'unité de soins intensifs de la maternité la plus proche.

NOTE Si des signes de surdosage en sulfate de magnésium apparaissent, administrer 10 ml d'une solution de gluconate de Ca à 10 % par voie intraveineuse pendant 10 minutes.

"Amniotomie" standard.

Cible- ouverture du sac amniotique.

Les indications– avant le déclenchement du travail, la stimulation du travail, la faiblesse activité de travail Contre-indications– conditions menaçantes pour la mère ou le fœtus

Complications possibles– perte de petites parties du fœtus, infection ascendante, lésion des vaisseaux du sac amniotique, décollement d'un placenta normalement localisé

Ressourceschaise gynécologique, couche individuelle, gants stériles, antiseptique pour traiter les organes génitaux externes de la femme, mâchoires de pinces à balles.

Algorithme d'action :

1. Présentez-vous.

2. Expliquez à la femme la nécessité de cette opération.

3. Obtenez le consentement éclairé du patient pour la procédure

4. Placer la femme sur la chaise gynécologique en plaçant un jetable

5. Traitez les organes génitaux externes de la femme avec une solution antiseptique et placez une couche stérile sur le ventre de la femme.

6. Effectuer une désinfection hygiénique des mains.

7. Habillez-vous gants jetables des deux mains.

8. À l'aide des doigts de votre main gauche, écartez les lèvres et insérez-les successivement dans le vagin.

indice, alors majeur main droite.

9. Insérez la mâchoire de la pince à balle dans le vagin entre l'index et le milieu

des doigts.

10. Percez le sac amniotique.

11. Insérez dans le trou résultant du sac amniotique. index, puis avec le majeur, élargissez progressivement le trou, éloignez les coquilles de la tête. Liquide amniotique relâchez lentement, sous le contrôle de vos doigts (prévention de la perte de petites pièces, décollement d'un placenta normalement situé).

13. Retirez vos doigts.

14. Retirez les gants et placez-les dans une boîte de mise au rebut sécurisée.

15. Lavez-vous les mains avec du savon.

16. Notez les données dans l'historique des naissances.

NOTE.

Pour l'hydramnios, faites un petit trou et libérez lentement l'eau. Il est nécessaire de contrôler le taux d'écoulement de l'eau, car si elle est libérée rapidement et brusquement, de petites parties du fœtus peuvent tomber. Après la perte des eaux, il est recommandé à la femme de s'allonger pendant 30 minutes.

Algorithme de détermination des protéines dans l'urine par la méthode express.

Cible: Diagnostic précoce de la gestose tardive.

Équipement: récipient, pot stérile, support avec tubes à essai, flacon contenant 30% d'acide sulfosalicylique ou acétique, pipette, brûleur à alcool.

1. Expliquez à la femme enceinte la nécessité de cette étude.

2. Demandez à la femme enceinte de recueillir l'urine dans un pot stérile.

3. Versez 4 à 5 ml dans le tube à essai. tester l'urine.

4. Test avec l'acide sulfosalicylique :

Ajoutez 6 à 10 gouttes d'acide sulfosalicylique à 30 % dans le tube à essai contenant de l'urine. S'il y a des protéines dans l'urine, des sédiments ou un trouble se formeront.

5. Test avec de l'acide acétique :

6 à 10 ml d'urine sont versés dans un tube à essai et bouillis sur un brûleur à alcool - l'urine contenant des protéines devient trouble. Ajoutez quelques gouttes d'une solution d'acide acétique à 3 à 5 % à une urine trouble. Si la nébulosité a disparu, le test est négatif.

Algorithme pour déterminer l'activité biologique de l'utérus pour l'accouchement. "Test d'ocytocine."

Cible: déterminer la préparation du corps à l'accouchement.

Équipement: Solution saline 0,9% - 500,0, 5 unités d'ocytocine, seringue 10,0, alcool à 70%, coton, montre avec trotteuse.

1. Expliquez à la femme enceinte la nécessité de cette étude.

2. Demandez à la femme enceinte de s'assurer d'un repos émotionnel et physique complet pendant 15 minutes en étant allongée sur le dos. Ceci est nécessaire pour éviter d'éventuelles contractions de l'utérus dues à l'influence de divers facteurs.

3. Remplissez une seringue de 10 grammes avec 10 ml. solution préparée à raison de 0,01 UI d'ocytocine pour 1 ml. solution isotonique de chlorure de sodium. La solution est préparée comme suit :

5 unités (1 ml) d'ocytocine sont diluées dans 500 ml. solution isotonique de chlorure de sodium (5 ID : 500,0 = 0,01 UNITÉ : 1 ml). À partir du flacon, utilisez une seringue de 10 grammes pour prélever 10,0 de la solution obtenue pour le test.

4. Effectuez une ponction veineuse et, en vous assurant qu'elle n'a pas provoqué de contractions utérines, procédez à administration intraveineuse solution d'ocytocine.

5. Déterminez l’heure à laquelle commencer à administrer la solution.

6. «Jerky», 1 ml. à intervalles de 1 minute, injectez la solution, mais pas plus de 5 ml. Arrêtez l'administration de la solution lorsque des contractions utérines surviennent.

7. Le test est considéré comme positif si des contractions utérines sont enregistrées dans les 3 premières minutes suivant le début des injections et si le travail survient dans les 24 à 48 heures suivantes. Les contractions de l'utérus qui apparaissent 4 minutes après l'injection sont prises en compte test négatif– la naissance aura lieu dans 3 à 8 jours.

8. Enregistrez le résultat dans la documentation principale.

5.4. Algorithme d'évaluation de la « maturité » du col de l'utérus.

Cible: déterminer l'état de préparation du col de l'utérus à l'accouchement.

Équipement: désinfectant, chiffons, gants stériles, table.

1. Expliquez à la femme enceinte la nécessité de cette procédure.

2. Traitez la chaise avec un chiffon imbibé d'une solution d'hypochlorite de calcium à 0,5 %

3. Placez une couche propre sur la chaise.

4. Placez la femme enceinte sur la chaise gynécologique.

5. Traitez les organes génitaux externes avec l'une des solutions désinfectantes.

6. Portez des gants stériles.

7. Avec votre main gauche, écartez les grandes lèvres avec vos premier et deuxième doigts et insérez le 2-3ème doigt de votre main droite dans le vagin.